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周浩丰1  吴允凯2  李建伟1  顾志红2  韦文美z  汪  渊s
    （1．合肥市疾病预防控制中心，安徽合肥230061：2．安徽医科大学基础医学院化学教研室，安徽合肥230032：3-安徽省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室，安徽合肥2300321
摘要：目的探讨实验性动脉粥样硬化兔肝脏组织中Zn\ Fe. Cu. Mn和Cr. Pb. Cd含量的变化。方法用高脂饮食复制兔动脉粥样硬化模型，然后给予全反式维甲酸建立治疗组模型，获取肝脏，用硝酸、过氧化氢混合液微波消解样品，采用原子吸收光谱法测定肝脏组织中Zn. Fe、Cu. Mn和Cr. Pb. Cd的含量。结果高脂组肝脏组织Zn\ Fe. Cu. Mn和Cr.  Pb、Cd含量分别为86. 09. 277.1、11. 07.5.366 mg/kg和115.2、286.0、210.5眦r／kg，治疗组肝脏组织Zn. Fe、c、Mn和Cr、Pb、Cd合量分别为135.3、347.7、10. 72、7.218 mg/kg和137.3、209. 4. 250.2Vg/kg。结论经过维甲酸治疗后，Zn、Fe、Mn. Cr含量明显提高，基本达到正常组水平。

全反式维甲酸（all - trans - retinoic acid，简称atRA）是维生素A类他合物的一种代谢产物。近年研究发现，维甲酸类化合物最引人注目的作用是预防及治疗一些恶性肿瘤，包括白血病、孚腺癌、皮肤癌、官颈癌、中枢神经系统肿瘤等¨‘41，但对动脉粥样硬化( AS)的影响研究较少。相关研究表明，atRA通过降低平滑肌细胞核OPN基因的活性，抑制OPN蛋白的表达和分泌，使平滑肌细胞停滞于收缩型，抑制平滑肌细胞迁移和增殖，从而抑制AS的形成是其可能机制。
    随着现代医学的发展，微量元素与疾病和药物治疗的关系越来越受到关注。动脉粥样硬化是心脑血管疾病的病理基础，流行病学调查和临床检查发现与机体微量元素含量变化有关。本研究选择高脂组兔给予atRA建立治疗组模型，获取肝脏组织，检测其Zn、Fe、Cu、Mn、Cr、Pb和Cd的含量，联系血清总胆固醇(TC)含量，以探讨atRA治疗高脂组兔后肝脏组织Zn、Fe、Cu、
Mn、Cr、Pb和Cd含量的变化，进一步了解atRA抑制动脉粥样硬化的机制，为进一步合理用药，达到最佳治疗效果提供思路。
1材料与方法
1.1仪器与试剂
    Thermo Solaar型原子吸收分光光度计（美国热电公司），CEM MarS 5型微波消解仪（美国CEM公司）。
    Zn: GBW 08620,1 000 mg/L; Fe: GBW 08616,1 000 mg/L; Cu: CBW 08615,1 000mg/L; Mn: GBW(E) 080157,1 000 mg/L;  Cr:  GSB07 - 1284 - 2000, 500 mg/L;  Pb:  GBW08619．1 000 mg/L; Cd:  GBW 08612，1 000 mg/L;  H202(GR)，HN03 (GR)，H：0为去离子水；atRA（安徽医科大学临床药理研究所提供）。
1.2   AS模型建立
    新西兰兔，清洁级，安徽医科大学实验动物中心提供。随机分成3组。A组（正常对照组）：11只，基础饲料（新西兰兔标准饲料）喂养12周；B组（高脂饮食组）：8只，高脂饲料（标准饲料中添加1%胆固醇和5%猪油）喂养12周；C组（维甲酸治疗组）：6只，高脂饲料喂养的同时，第6周开始给予atRA 10 mg/( kg．d)，共12周。
1.3  实验方法
1.3.1样品处理将采集的肝脏组织用蒸馏水、高纯水洗涤两次。于电热鼓风干燥箱烘干至恒质量。准确称取0.5 9肝脏组织样品，置于聚四氟乙烯微波消解罐的内罐中，各加入y( HN03)+(H：O：)=3+1混合液8 mL，放入微波消解仪中，按表1中的微波消解程序迸行消解。消解完毕后放人赶酸装置中，120℃加热至溶液剩余0.5 -1 mL，取下冷却后将消解液转移并定容到
25 mL比色管中，同时备两份空白溶液做对照[6-8]。

3讨论

通过高脂组和正常组微量元素含量数据分析可知脂蛋白代谢异常对微量元素的吸收具有抑制作用。由于高脂组和atRA治疗组兔饲喂的饲料一致，饲料的影响因素可以不予考虑。本研究发现经过atRA治疗后，高脂组兔肝脏组织Zn平均质量分数由86. 09 mg/kg提升到135.3 mg/kg，基本达到正常组兔水平。由于相关研究表明，Zn缺乏可引起急性和慢性肝病，补充Zn可对抗毒素引起的肝损伤和治疗肝性脑病‘9 -10]。治疗组Zn含量提高，说明atRA能够有效提升肝脏的抗氧化能力，减少肝损伤。
由于Fe离子具有广泛的生理功能和生物学作用，缺Fe可引起能量代谢障碍，导致脑血管疾病‘11 -12]。本研究发现经过atRA治疗后，高脂组兔Fe含量明显改善，基本达到正常组兔水平。所以atRA对Fe吸牧可能具有促进作用。相关研究表明，w( Zn)/w( Cu)比是衡量肝脏病变的一个重要指标，w( Zn)/w( Cu)比过高或者过低都可能导致肝硬化、肝炎和肝癌等肝脏病变发生。亦有研究表明，肝与大动脉的w( Zn)   w(Cu)比值与动脉粥样硬化呈负相关‘13-14]，从研究数据可知，经过atRA治疗后，高脂组兔Cu含量略微下降，w( Zn)/w( Cu)比基本达到正常组兔水平。
根据流行病学统计，Mn含量下降与肝脏疾病发病几率上升存在密切关系。Mn参与蛋白质的合成、遗传信息的传递，对人体正常代谢起到催化作用。体内缺Mn，与Mn有关的酶的活性下降，导致机体免疫力降低，内分泌失调‘15]。从研究数据可知，经过atRA治疗后，高脂组兔Mn含量上升34.3%，说明维甲酸对Mn的吸收有明显促进作用，故对肝脏疾病的预防起到积极
作用。
  Cr能促进脂质和糖的代谢，增强免疫功能，改善繁殖能力。体内缺Cr，容易引起糖尿病和高血脂症，还可引起动脉粥样硬化。根据流行病学统计Cr含量下降与肝脏疾病发病几率上升存在密切关系‘16]，从研究数据可知，经过atRA治疗后，高脂组兔Cr含量上升19. 12%，故对肝脏疾病的预防起到积极作用。
  高脂组兔与治疗组兔Pb、Cd含量比正常组兔都低一些，治疗后Pb、Cd含量变化不明显，说明atRA对Pb、Cd昀吸收无明显抑制作用。但是高脂组与治疗组比正常组兔的含量都偏低。说明脂蛋白代谢异常对微量元素吸收具有一定抑制作用。
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掌握微量元素知识的重要性（一）
微量元素身价不凡
元素医学里有它，因它是生命科学的前沿阵地；
现代医学里有它，因它是细胞学及酶学的基础物质；
传统医学里有它，因它是五行学说及阴阳学说的理论基础；
营养科学里有它，因它是人体不能合成的重要营养素；
保健科学里有它，因它是人体养生保健的重要物质基础；
环境科学里有它，因它是环境评价和环境监测的有力指标；
农业科学里有它，因它能使农作物增产，又能使农产品有保健功能；
植物科学里有它，因它能改良植物遗传及品质的元素；
动物科学里有它，因它是科学喂养和天然放牧的有效成份。
哪里少了它，哪里就少个宝。
微量元素作用不徽
它能使克山病高发成为历史，它能使克订病流行成为过去；
它能使亚健康比率降低，它能使人类寿命提高；
它能使出生人口素质提高，它能使少年聪明伶俐；
它能使成年人活力充沛，它能使老年人健康长寿；
它能使中西医紧密结合，它能使中医药数字量化；
它能使慢性病发病减少，它能使疑难病治病有方；
它能使环境质量标化，它能减少地方病的发生；
它能使生物养分提高，它能使农牧渔增产丰收。
它的量虽微，但作用巨大。